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          hIL-2 NPG小鼠

          1. 基本信息


          品系名稱:NOD. Prkdcscid Il2rgtm1 VstTg(Csf1p –IL2)Vst/Vst

          常用名:hIL2-NPG /Vst; NPG.hIL-2

          背景  :NOD-scid/NcrCrl

          毛色:白色

          品系建立:將mouse CSF1-promoter與人Interleukn-2(IL-2)基因的CDS序列相連接,構建pcDNA3.1-CSF1P-IL2轉基因載體質粒,擴增、抽提、去內毒素后,使用Hind3+Stu1雙酶切線性化,回收3.1Kb目的片段進行胚胎顯微注射,注射到NPG小鼠受精卵的原核中。在獲得的子代中篩選合適表達量的陽性小鼠。在隔離器中,按照轉基因陽性鼠配NPG小鼠的方式擴繁,建立商品化hIL2-NPG小鼠品系。


          2.hIL-2 NPG表型特征


          在NPG小鼠中表達人的IL-2細胞因子。IL-2 是一種介導白細胞之間相互作用的細胞因子,起先被稱為T細胞生長因子,可刺激T細胞、NK細胞、B細胞的增殖并加強它們的功能。由于小鼠的IL-2與人的IL-2存在種屬差異,而且在NPG這樣的免疫缺陷小鼠中IL-2的分泌本來就減弱,所以在造血干細胞移植或免疫細胞移植建立的人源化免疫系統小鼠中缺乏IL-2刺激信號,致使依賴IL-2因子的細胞,尤其是NK細胞的分化發育和功能發揮受到影響。表達人IL-2的NPG小鼠可以促進人源化免疫系統小鼠T細胞、NK細胞的分化發育,增強其功能。

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          hIL2-NPG小鼠的外周血中,ELISA檢測人IL-2在血清里的含量為40~70pg/ml。

          以下是hIL2-NPG小鼠移植臍帶血分離的CD34陽性造血干細胞之后主要人源免疫細胞的重建的一個實例。


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          ▲在hIL2-NPG小鼠上移植CD34+造血干細胞4周后,小鼠外周血中人源CD45陽性細胞的比例可以達到較高水平(均值達40%以上)。在人源CD45陽性細胞中,CD56陽性的NK細胞所占比例較高,并在移植8周之后穩定維持高水平重建。

          IL-2除了促進NK細胞的分化發育,對T細胞的發育也有較強的促進作用。但是由于T細胞分化發育較晚,在HSC移植12周時CD3陽性T細胞仍處在較低水平。因此,HSC移植的hIL2-NPG小鼠模型有約兩個月的以人源NK細胞為主的窗口期(移植后4-12周)。此模型可以作為體內研究NK功能以及通過NK細胞功能發揮抗腫瘤、抗病毒作用(如ADCC作用)藥效評價的理想模型。


          除應用于CD34+造血干細胞移植外,hIL2-NPG小鼠也支持從成體PBMC分離的NK細胞的移植。經數據驗證,純化的NK細胞可在此小鼠上穩定維持及增殖。




          hIL-2 NPG小鼠核心技術:
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